NIBSC 20/138標(biāo)準(zhǔn)品SARS-CoV-2 RNA包含嵌合慢病毒顆粒 (LVP)，其中人類免疫缺陷病毒 (HIV-1) 基因已被武漢一號(hào) SARSCoV-2 分離株的基因取代。在世衛(wèi)組織國際合作研究中，該制劑與世衛(wèi)組織 SARS-CoV-2 RNA 國際標(biāo)準(zhǔn)同時(shí)進(jìn)行了評(píng)估 (1)。工作試劑的預(yù)期用途是作為檢測(cè) SARS-CoV-2 RNA 的核酸擴(kuò)增技術(shù) (NAT) 檢測(cè)中的二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)或陽性對(duì)照。

NIBSC 20/138標(biāo)準(zhǔn)品SARS-CoV-2 RNA作為建立 WHO SARSCoV-2 RNA 國際標(biāo)準(zhǔn)（NIBSC 目錄號(hào) 20/146）的合作研究的一部分進(jìn)行了校準(zhǔn)，發(fā)現(xiàn)其單位為 6.73 Log10 IU/mL ，當(dāng)在 0.5mL 分子級(jí)水或 PBS 中復(fù)溶時(shí)，95% 的置信限為 6.58 至 6.88。

每瓶NIBSC 20/138含有 0.5mL 凍干、非傳染性、合成 SARS-CoV-2 RNA，包裝在 HIV-1 顆粒中。已將單核苷酸突變隨機(jī)插入到 SARS-CoV-2 RNA 序列中以防止蛋白質(zhì)表達(dá)，并且通過將 SARS-CoV-2 基因組分成四個(gè)重疊片段來制備材料。

嵌合 LVP 在通用緩沖液中等摩爾配制，該緩沖液包含 10 mM Tris-HCl (pH 7.4)、0.5% 人血清白蛋白和 1% D-(+)- 海藻糖脫水物，背景為 1x10^5人類基因組 DNA 的拷貝數(shù)/mL。包含 SARS-CoV-2 RNA 的四種嵌合 LVP 的完整共有序列保存在 GenBank 登記號(hào) MW059032、MW059033、MW059034、MW059035 下。

NIBSC 20/138標(biāo)準(zhǔn)品SARS-CoV-2 RNA材料應(yīng)在 0.5 mL 分子級(jí)水或 PBS 中復(fù)溶。添加后，安瓿應(yīng)在環(huán)境溫度下放置 20 分鐘，然后混合，避免產(chǎn)生過多的泡沫。重構(gòu)后，應(yīng)將 20/138 稀釋到適合所用材料/測(cè)定的基質(zhì)中。

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